• подсчет эритроцитов производится далее в счетной камере Горяева. Чистое и сухое покровное стекло притирают к камере так, чтобы в местах их соприкосновения образовались радужные кольца;

• перед заполнением камеры содержимое пробирки несколько раз перемешивают, затем концом круглой стеклянной палочки отбирают из пробирки, наклоняя ее, каплю крови и подносят к краю шлифованного стекла камеры. Если одной капли недостаточно для полного заполнения камеры, то дополняют ее другой каплей;

• после заполнения камеру оставляют на 1-2 мин в покое для оседания форменных элементов крови, а затем помещают ее под микроскоп;

18

• подсчитывают форменные элементы при малом увеличении микроскопа (объектив х8 или х9, окуляр х10 или х15) при затемненном поле зрения (с прикрытой диафрагмой и при опущенном конденсоре);

• считают эритроциты в 80 малых квадратах, что соответствует 5 большим квадратам, расположенным по диагонали (рис. 3б);

• по правилам, счету подлежат эритроциты, лежащие внутри маленького квадрата, и те, которые находятся на левой и верхней его границах (рис. 4).

Подсчитав количество эритроцитов в 80 малых квадратах, рассчитывают по формуле количество эритроцитов в 1 мм3 крови и в 1 литре

где А — количество эритроцитов в 80 малых квадратах; П — степень разведения (200).

Фотометрическое определение числа эритроцитов

• 20 мкл крови, набранной в капиллярную пипетку от гемометра Сали, вносят в 9 мл 3% раствора №01;

• содержимое перемешивают и наливают в кювету с толщиной слоя 3 мм;

• измерение производится через 50-60 сек после заполнения кюветы, когда вихревые движения в кювете прекращаются, а оседание эритроцитов еще не началось;

• измеряют экстинкционный коэффициент (Е) при длине волны 750 нм, используя в качестве контроля 3% раствор №01;

• количество эритроцитов вычисляют по специальной таблице, которую предварительно выводят опытным путем на основании построения калибровочной кривой (сравнивают с камерным методом).

Метод не трудоемок и удобен для серийной работы, однако недостатком его является зависимость результата не только от количества эритроцитов, но и от их размера, а также от концентрации гемоглобина.